New surgical maneuver to position the graft in a descemet stripping with automated endothelial keratoplasty surgery / Nova manobra cirúrgica para posicionar o enxerto em cirurgia de ceratoplastia endotelial com desnudamento automatizado da Descemet

ABSTRACT Objective: To describe a new surgical maneuver to position the graft in a Descemet Stripping with Automated Endothelial Keratoplasty (DSAEK) surgery. Methods: Case series. Results: This technique allows a correct repositioning of the graft in a minimally invasive way. Conclusion: This new surgical maneuver was successful in manipulating the graft in DSAEK surgery and therefore might be effective and safe.

RESUMO Objetivo: Descrever uma nova manobra cirúrgica para posicionar o enxerto em uma cirurgia de ceratoplastia endotelial automatizada com desnudamento da Descemet. Métodos: Série de casos. Resultados: A técnica permitiu o correto reposicionamento do enxerto de forma minimamente invasiva. Conclusão: Esta nova manobra cirúrgica foi bem-sucedida para manipular o enxerto na cirurgia ceratoplastia endotelial automatizada com desnudamento da Descemet e, portanto, pode ser eficaz e segura.

Endothelial assessment of donated tectonic corneas: a viable option for posterior lamellar transplantation / Avaliação da viabilidade do uso de córneas tectônicas em transplantes lamelares posteriores a partir da análise da vitalidade das células endoteliais

ABSTRACT Purpose: Donated corneas are classified as tectonic if there are defects within any layers of the cornea which would prevent a satisfactory visual outcome after transplantation. This study aimed to evaluate whether some tectonic corneas have sufficient endothelial characteristics to allow their use in posterior lamellar keratoplasty, and explored their reclassification for use in this sight-improving procedure. Methods: A retrospective review of all corneal tissues preserved by the Sorocaba Eye Bank from January to April of 2014 was performed. All donated corneas classified as tectonic were included. Endothelial tissue was defined as healthy and viable for posterior lamellar keratoplasty if endothelial cell density was ≥2000 cells/mm2. Additional parameters analyzed included Descemet folds and stretch marks, loss of endothelial cells, corneal endothelial polymegathism/ pleomorphism, pseudo-guttata, and reflectivity. Results: During the study period, 2,847 corneas were preserved, of which 423 (14.85%) were classified as tectonic. Of these, 87 (20.56%) were reported as having endothelial viability and were included in the posterior lamellar keratoplasty group. Average corneal endothelial cell density of this group was 2,471 SD ± 256 cells/mm2 (range 2012-2967 cells/mm2). Conclusion: A significant number of corneas classified as tectonic showed endothelial viability and were included in the posterior lamellar keratoplasty group (20.56%). Despite stromal and/or epithelial alterations, these corneas could have been potentially distributed for posterior lamellar transplantation to improve vision, thus reducing the corneal transplantation waiting period. This study highlights how corneal tissue reclassification could increase the potential amount of corneal tissue available for optical transplantation.

RESUMO Objetivo: Avaliar a vitalidade endotelial das córneas classificadas como tectônicas e discutir a viabilidade de seu uso na ceratoplastia lamelar posterior. Métodos: Realizou-se uma revisão retrospectiva de todos os tecidos corneanos preservados pelo Banco de Olhos Sorocaba de janeiro a abril de 2014. Todas as córneas doadas classificadas como tectônicas foram incluídas e avaliadas com ênfase na vitalidade endotelial. Os parâmetros de avaliação da lâmpada de fenda de cada córnea e densidade de células endoteliais medidos por microscópio especular foram registrados: córneas que apresentavam vitalidade endotelial apesar de alterações no estroma e/ou no epitélio foram selecionadas e incluídas em um grupo denominado grupo lamelar posterior. O tecido endotelial foi definido como saudável e viável para a ceratoplastia lamelar posterior, se houvesse uma densidade de células endoteliais ≥2.000 células/mm2. Outros parâmetros também foram analisados, incluindo; estrias ou pregas na Descemet, perda de células endoteliais, polimegatismo e pleomorfismo endotelial, pseudo-guttata e reflexividade endotelial. Resultados: Durante o período do estudo, foram preservadas 2.847 córneas, das quais 423 (14,85%) foram classificadas como tectônicas. Dessas, 87 (20,56%) apresentaram vitalidade endotelial e foram incluídos no grupo lamelar posterior. A densidade média das células endoteliais da córnea deste grupo era de 2.471 SD ± 256 células/mm2, variando de 2.012 a 2.967 células/mm2. Conclusão: Um número significativo de córneas classificadas como tectônicas apresentaram vitalidade endotelial e foram incluídas no grupo lamelar posterior (20,56%). Apesar de alterações estromais e/ou epiteliais, estas córneas poderiam ter sido potencialmente distribuídas para transplantes lamelares posteriores com finalidade ótica, otimizando a disponibilidade de tecidos, com impacto positivo na saúde pública.

Descemet's membrane endothelial keratoplasty with a simplified technique and low complication rate: the samba technique / Ceratoplastia endotelial da membrana de Descemet com técnica simplificada e baixa taxa de complicação: a técnica de samba

ABSTRACT Purpose: We report a simplified Descemet's membrane endothelial keratoplasty (DMEK) technique that involves safe and effective preparation and introduction, correct orientation, and easy unfolding of the donor graft inside the recipient anterior chamber. Methods: In this retrospective study, we assessed the surgical outcomes of 26 eyes of 23 consecutive patients (mean age, 61.2 ± 11.4 yr; range, 39-82 yr) with Fuchs endothelial corneal dystrophy (n=19) or bullous keratopathy (n=7) who underwent the Samba technique, a simplified DMEK method, at the Sorocaba Ophthalmology Hospital, Sorocaba Eye Bank, Sorocaba, Brazil, between August 2011 and July 2012. Results: Of the 26 operated eyes, only two (7.7%) experienced partial graft detachment requiring rebubbling, and in those eyes, the graft was reattached successfully with one air bubble. There were no cases of primary graft failure, tissue loss, or pupillary block. All patients with good visual potential achieved a best-corrected visual acuity of 20/30 or better at 6 months, and 82.6% achieved a best-corrected visual acuity of 20/30 or better 1 month postoperatively. Conclusion: In this retrospective study, the Samba technique, a simplified DMEK procedure, was safe and effective, with an acceptably low rebubbling rate and no incidence of primary graft failure or pupillary block. Moreover, rapid and nearly complete visual recovery was achieved. This simplified DMEK technique can be adopted by corneal surgeons worldwide as a primary treatment for endothelial dysfunction with a less steep learning curve and low rate of postoperative complications.

RESUMO Objetivo: Relatar uma técnica simplificada de ceratoplastia endotelial da membrana de Descemet (DMEK) que envolve a preparação e a introdução seguras e eficazes, a orientação correta e o fácil desdobramento do enxerto doador dentro da câmara anterior receptora. Métodos: Neste estudo retrospectivo, foram revisados e avaliados os resultados cirúrgicos de 26 olhos de 23 pacientes consecutivos (idade média: 61,2 ± 11,4 anos, intervalo: 39 a 82 anos) com distrofia corneana endotelial de Fuchs (n=19) ou ceratopatia bolhosa (N=7) submetidos à técnica "Samba", método de DMEK simplificado, no Hospital Oftalmológico de Sorocaba, Banco de Olhos de Sorocaba, Sorocaba, Brasil, entre agosto de 2011 e julho de 2012. Resultados: Dos 26 olhos operados, apenas 2 olhos (7,7%) apresentaram descolamento parcial do enxerto que necessitou de nova injeção de ar na câmara anterior "re-bubble", e nesses olhos o enxerto foi posicionado com sucesso com o procedimento de "re-bubble". Nenhum dos 26 olhos apresentaram falência primária do enxerto ou perda de tecido, ou bloqueio pupilar. Todos os pacientes com bom potencial visual obtiveram a acuidade visual melhor corrigida de 20/30 ou melhor e 82,6% tinham acuidade visual melhor corrigida de 20/30 ou melhor com 1 mês de cirurgia. Conclusão: Neste estudo retrospectivo, a técnica de Samba, um procedimento de DMEK simplificado, mostrou-se segura e eficaz, com uma taxa de "re-bubble" aceitavelmente baixa e nenhuma incidência de falência primária ou complicação com bloqueio pupilar. Além disso, a recuperação visual rápida e completa foi rapidamente alcançada. Esta técnica DMEK simplificada pode ser adotada por cirurgiões de córnea em todo o mundo como um tratamento primário para disfunção endotelial com uma curva de aprendizado rápida e baixa taxa de complicações pós-operatórias.

Visual outcomes after deep anterior lamellar keratoplasty using donor corneas without removal of Descemet membrane and endothelium / Resultados visuais após transplante lamelar anterior profundo utilizando botão corneano sem remoção da membrana de Descemet e endotélio

ABSTRACT Purpose: The optical quality of the interface after deep anterior lamellar keratoplasty (DALK) using the big-bubble technique has been shown to be excellent, leading to results comparable to penetrating keratoplasty. However, there is little in the literature with respect to the controversy surrounding the preparation of the donor cornea. The purpose of this study was to evaluate visual acuity (VA) in patients with keratoconus who underwent DALK without removal of the donor graft endothelium. Methods: The records of 90 patients who underwent DALK without the removal of the Descemet membrane (DM) and endothelium were retrospectively reviewed. Data collected included uncorrected VA (UCVA) and spectacle-corrected VA (SCVA) at 7, 30, 180 days, and 1 year postoperatively. Contact lens-corrected visual acuity (CLVA) was evaluated after 1 year of the procedure. Results: UCVA was significantly better than preoperative values at 7 days (p<0.001), 30 days (p<0.001), 180 days (p<0.001), and 1 year (p<0.001) after surgery. The 1-year postoperative mean SCVA and CLVA also improved when compared with preoperative SCVA (p<0.001 for both). Conclusions: DALK utilizing donor corneas with attached Descemet membrane and endothelium results in satisfactory VA in patients with keratoconus.

RESUMO Objetivos: A qualidade óptica da interface após ceratoplastia lamelar anterior profunda (DALK) utilizando a técnica de "Big Bubble" mostrou-se ser excelente, levando a resultados comparáveis aos da ceratoplastia penetrante. No entanto, há poucos dados na literatura com respeito à controvérsia em torno da preparação da córnea doadora. O objetivo deste estudo foi avaliar a acuidade visual (VA) em pacientes com ceratocone submetidos DALK sem a remoção da membrana de descemet e endotélio do tecido doador. Métodos: Os prontuários de 90 pacientes que foram submetidos a DALK sem a remoção da membrana Descemet (DM) e do endotélio foram avaliados retrospectivamente. Os dados coletados incluíram VA sem correção (UCVA) e VA corrigida por óculos (SCVA) aos 7, 30, 180 dias, e 1 ano de pós-operatório. A acuidade visual corrigida por lente de contato (CLVA) foi avaliada após 1 ano do procedimento. Resultados: UCVA no pós-operatório melhorou após 7 dias (p<0,001); 30 dias (p<0,001); 180 dias (p<0,001); e após 1 ano (p<0,001). Ocorreu melhora da SCVA pré-operatória quando comparada com a SCVA e CLVA após 1 ano (p<0,001 para ambos). Conclusão: Transplante lamelar anterior utilizando córneas doadas com membrana de Descemet e endotélio demonstrou resultados visuais satisfatórios em pacientes com ceratocone.

Comparison of 20% sulfur hexafluoride with air for intraocular tamponade in Descemet membrane endothelial keratoplasty (DMEK) / Comparação de hexafluoreto de enxofre a 20% com ar para tamponamento intraocular na ceratoplastia endotelial de membrana Descemet (DMEK)

ABSTRACT Purpose: To compare the effect of 20% sulfur hexafluoride (SF6) with that of air on graft detachment rates for intraocular tamponade in Descemet membrane endothelial keratoplasty (DMEK). Methods: Forty-two eyes of patients who underwent DMEK by a single surgeon (A.S.J.) at Wilmer Eye Institute between January 2012 and 2014 were identified; 21 received air for intraocular tamponade and the next consecutive 21 received SF6. The main outcome measure was the graft detachment rate; univariate and multivariate analyses were performed. Results: The graft detachment rate was 67% in the air group and 19% in the SF6 group (p<0.05). No complete graft detachments occurred, and all partial detachments underwent intervention with injection of intraocular air. The percentages of eyes with 20/25 or better vision were not different between the groups (67% vs. 71%). Univariate analysis showed significantly higher detachment rates with air tamponade (OR, 8.50; p<0.005) and larger donor graft size (OR, 14.96; p<0.05). Multivariate analysis with gas but not graft size included showed that gas was an independent statistically significant predictor of outcome (OR, 6.65; p<0.05). When graft size was included as a covariate, gas was no longer a statistically significant predictor of detachment but maintained OR of 7.81 (p=0.063) similar to the results of univariate and multivariate analyses without graft size. Conclusion: In comparison with air, graft detachment rates for intraocular tamponade in DMEK were significantly reduced by 20% SF6.

RESUMO Objetivo: Comparar as taxas de descolamento do botão endotelial com o uso de gás hexafluoreto de enxofre a 20% (SF6) em relação ao ar para o tamponamento intraocular na ceratoplastia endotelial da membrana de Descemet (DMEK). Métodos: Quarenta e dois olhos foram operados com a técnica de DMEK por um único cirurgião (A.S.J.) no Wilmer Eye Institute entre janeiro de 2012 a 2014. Os primeiros 21 olhos receberam ar para o tamponamento intraocular após o enxerto do botão endotelial e os 21 olhos seguintes receberam SF6. O desfecho primário medido foi a taxa de descolamento do botão endotelial por análise univariada e multivariada. Resultados: A taxa de descolamento do botão endotelial foi de 67% no grupo que recebeu ar vs 19% no grupo que recebeu SF6 (p<0,05). Não houve nenhum descolamento total de botão e todos os parciais foram tratados com injeção de ar intraocular. Não houve diferença estatística significativa entre os grupos em relação a AV de 20/25 ou melhor (67% vs 71%). A análise univariada demonstrou maior taxa de descolamento com o tamponamento por ar intraocular (OR 8,50, p<0,005) e com botões doadores maiores (OR 14,96, p<0,05). Na análise multivariada, incluindo gás, mas não o tamanho do botão doador, o tipo de gás usado permaneceu sendo um fator preditivo independente e estatisticamente significativo para o desfecho primário, com OR de 6,65 (p<0,05). Porém, quando o tamanho do botão doador foi incluso como covariável, o gás perdeu a sua significância como preditor de descolamento, mantendo o OR de 7,81 (p=0,063), semelhante as análises univariada e multivariada excluindo o tamanho do botão doador. Conclusão: O uso de gás hexafluoreto de enxofre a 20% (SF6) para o tamponamento intraocular reduz a taxa de descolamento do botão endotelial quando comparado ao uso de ar no DMEK.

Effectiveness and safety of endothelial keratoplasty for pseudophakic and aphakic bullous keratopathy: a systematic review of randomized controlled trials and cohort studies / Eficácia da ceratoplastia endotelial no tratamento da ceratopatia bolhosa pseudofácica e afácica: revisão sistemática de ensaios clínicos randomizados e estudos coortes

ABSTRACT Objective: For nearly a century, penetrating keratoplasty has been the surgical technique of choice in the management of corneal changes. However, in recent years, several lamellar keratoplasty techniques have been developed, modified or improved, especially techniques for replacing the posterior portion, for the correction of bullous keratopathy. The aim of this study was to evaluate the effectiveness and safety of endothelial keratoplasty versus penetrating keratoplasty for pseudophakic and aphakic bullous keratopathy. Methods: A systematic review of the literature was carried out, and the main electronic databases were searched. The date of the most recent search was from the inception of the electronic databases to December 11, 2015. Two authors independently selected relevant clinical trials, assessed their methodological quality and extracted data. Results: The electronic search yielded a total of 893 published papers from the electronic databases. Forty-four full-text articles were retrieved for further consideration. Of these 44 full-text articles, 33 were excluded because they were all case series studies; therefore, ten studies (with one further publication) met the inclusion criteria: one randomized clinical trial with two publications; three controlled studies; and six cohort studies. The clinical and methodological diversity found in the included studies meant that it was not possible to combine studies in a metaanalysis. Conclusions: There is no robust evidence that endothelial keratoplasty is more effective and safe than penetrating keratoplasty for improving visual acuity and decreasing corneal rejection for pseudophakic and aphakic bullous keratopathy. There is a need for further randomized controlled trials.

RESUMO Objetivo: Durante quase um século, a ceratoplastia penetrante tem sido a técnica cirúrgica de escolha no tratamento de doenças corneais. No entanto, nos últimos anos, têm sido desenvolvidas várias técnicas de transplante lamelar, especialmente modificadas ou aperfeiçoadas para substituir a porção posterior para a correção da ceratopatia bolhosa. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia e segurança da ceratoplastia endotelial quando comparada a ceratoplastia penetrante para a ceratopatia bolhosa afácica ou pseudofácica. Métodos: Uma revisão sistemática da literatura foi realizada, e as principais bases de dados eletrônicas foram pesquisadas. A data das bases de dados da última pesquisa foi 11 de dezembro de 2015. Dois autores selecionaram independentemente os estudos relevantes, avaliaram sua qualidade metodológica e extraíram os dados. Resultados: A busca eletrônica resultou em um total de 893 artigos publicados a partir das bases de dados eletrônicas. Quarenta e quatro artigos de texto completos foram recuperados para uma análise mais aprofundada. Destes 44 artigos de texto completos, 33 foram excluídos por serem estudos de séries de casos, portanto, dez estudos (com uma publicação adicional) preencheram os critérios de inclusão: um ensaio clínico randomizado, três estudos controlados e seis estudos de corte. A diversidade clínica e metodológica encontrada nos estudos incluídos tornou impossível combinar os resultados em uma metaanálise. Conclusões: Não há evidencias robustas de que a ceratoplastia endotelial é mais eficaz e segura do que o transplante penetrante de córnea para melhorar a acuidade visual e diminuir a rejeição da córnea na ceratopatia bolhosa afácica ou pseudofácica. Há necessidade de mais estudos controlados, randomizados.

In vivo ultrathin Descemet stripping automated endothelial keratoplasty with a low-energy and high-frequency femtosecond laser / In vivo Descemet stripping automated endothelial keratoplasty ultrafina com laser de femtosegundo de baixa energia e alta frequência

This case report describes the production of an ultrathin endothelial donor corneal lamella using a femtosecond laser with low energy and a high frequency. In addition, we report its use in vivo in an eye with pseudophakic bullous keratopathy. The outcomes were observed 3 months after surgery in terms of the change in endothelial donor lamella and full cornea thickness (including pachymetric mapping), visual acuity, and endothelial cell count.

Este relato de caso mostra a confecção de uma lamela corneana doadora endotelial ultrafina com o uso de um laser de femtosegundo de baixa energia e alta taxa de repetição, e sua utilização in vivo em um paciente com ceratopatia bolhosa do pseudofácico. O resultado final foi observado quanto a evolução da espessura da lamela endotelial doadora e de toda a córnea (incluindo mapa paquimétrico), da acuidade visual, e da contagem endotelial ao final de 3 meses de pós-operatório.

Analysis of low-energy and high-frequency femtosecond laser for the construction of deep anterior donor corneal lamellae / Laser de femtossegundo de baixa energia e alta frequência na confecção de lamelas corneanas doadoras

Purpose: To evaluate the efficacy and reliability of a low-energy femtosecond laser with a high repetition rate for construction of deep anterior donor corneal lamellae. Methods: This was a prospective laboratory investigation. Twenty-five human corneal buttons were femtosecond laser cut to create thick anterior lamellae (diameter, 10mm; thickness, 500µm). The laser cuts were made using an LDV® femtosecond laser in a Ziemer® anterior chamber. To obtain a better edge, the lamellae were trephined with an 8mm trephine (Katena®). The central corneal thickness and the anterior lamellae were measured using a Mitutoyo® thickness gauge with an accuracy of 0.001mm. Results: The central thickness of the 25 corneas ranged from 500 to 705µm (mean, 584 ± 51µm). The thickness of the anterior lamellae ranged from 420 to 480µm (mean, 455 ± 12.7µm). The anterior lamellae diameters were 7.90 ± 0.1mm, and all laser cuts were round. The lamellar interfaces appeared regular by surgical microscopy. There were no cases of inter-lamellar adhesion. Conclusion: The LDV® femtosecond laser appears to be a safe and reliable instrument for cutting deep anterior lamellae from donor corneoscleral buttons. Minimal variation in donor lamellar depth with the laser will be useful for creating donor corneal tissue for deeper anterior lamellar keratoplasty or endothelial keratoplasty surgery or both from a single donor cornea. .

Objetivo: Avaliar a eficácia e segurança de um laser de femtossegundo de baixa energia e alta taxa de repetição para confecção de lamelas corneanas doadoras anteriores profundas. Métodos: Este é um estudo prospectivo de investigação laboratorial. Vinte e cinco botões corneanos foram cortados com laser de femtossegundo para criar lamelas corneanas doadoras anteriores profundas (diâmetro, 10mm; espessura, 500µm). O corte a laser foi realizado com femtosecond laser LDV® na câmara anterior artificial da Ziemer®. Para obter-se uma melhor borda, as lamelas foram trepanadas com um trépano de 8mm da Katena®. A paquimetria corneana central e as lamelas anteriores foram aferidas utilizando o paquímetro Mitutoyo®, com acurácia de 0.001mm. Resultados: A paquimetria central das 25 córneas variou de 500 a 705µm (média de 584 ± 51µm). A espessura das lamelas anteriores variou de 420 a 480µm (media de 455 ± 12.7µm). O diâmetro das lamelas corneanas doadoras foi 7.90 ± 0,1mm, sendo todos os cortes redondos. As interfaces lamelares apresentaram-se regular ao microscópio cirúrgico. Não houve casos de adesão interlamelar. Conclusão: O laser de femtossegundo LDV® mostrou-se seguro e eficaz para confeccionar lamelas corneanas doadoras a partir de botões córneo-esclerais. Mínima variação na espessura das lamelas doadoras confeccionadas com o laser será útil para criação de tecidos corneanos doadores para ceratoplastia lamelar anterior profunda ou ceratoplastia endoteliais, ou ambas, a partir de uma só córnea. .

Endothelial keratoplasty: evolution and horizons / Transplante endotelial de córnea: evolução e horizontes

Endothelial keratoplasty has been adopted by corneal surgeons worldwide as an alternative to penetrating keratoplasty (PK) in the treatment of corneal endothelial disorders. Since the first surgeries in 1998, different surgical techniques have been used to replace the diseased endothelium. Compared with penetrating keratoplasty, all these techniques may provide faster and better visual rehabilitation with minimal change in refractive power of the transplanted cornea, minimal induced astigmatism, elimination of suture-induced complications and late wound dehiscence, and a reduced demand for postoperative care. Translational research involving cell-based therapy is the next step in work on endothelial keratoplasty. The present review updates information on comparisons among different techniques and predicts the direction of future treatment.

O transplante endotelial tem sido utilizado por cirurgiões de córnea em todo o mundo como uma alternativa ao transplante penetrante no tratamento das desordens do endotélio corneano. Desde as primeiras cirurgias em 1998, diferentes técnicas cirúrgicas tem sido utilizadas para substituir o endotélio doente. Comparadas ao transplante penetrante, estas técnicas oferecem uma reabilitação visual melhor e mais rápida com mínima alteração do poder refrativo da córnea transplantada, mínimo astigmatismo induzido, eliminação das complicações induzidas pela sutura e deiscência tardia da incisão, além de menor necessidade de cuidados pós-operatórios. Pesquisas translacionais envolvendo terapias celulares são o próximo passo em transplantes endoteliais. Este artigo contém uma fonte de dados atualizada comparando diferentes técnicas e futuros tratamentos.

A human corneal endothelium equivalent constructed with acellular porcine corneal matrix.

Background & objectives: Artificial corneal endothelium equivalents can not only be used as in vitro model for biomedical research including toxicological screening of drugs and investigation of pathological corneal endothelium conditions, but also as potential sources of grafts for corneal keratoplasty. This study was aimed to demonstrate the feasibility of constructing human corneal endothelium equivalents using human corneal endothelial cells and acellular porcine corneal matrix. Methods: Porcine corneas were decellularized with sodium dodecyl sulphate (SDS) solution. Human corneal endothelial cells B4G12 were cultured with leaching liquid extracted from the acellular porcine corneal matrix, and then cell proliferative ability was evaluated by MTT assay. B4G12 cells were transplanted to a rat corneal endothelial deficiency model to analyze their in vivo bio-safety and pump function, and then seeded and cultured on acellular porcine corneal matrix for two wk. Corneal endothelium equivalents were analyzed using HE staining, trypan blue and alizarin red S co-staining, immunofluorescence and corneal swelling assay. Results: The leaching liquid from acellular porcine corneal matrix had little influence on the proliferation ability of B4G12 cells. Animal transplantation of B4G12 cells showed that these cells had similar function to the native cells without causing a detectable immunological reaction and neoplasm in vivo. These formed a monolayer covering the surface of the acellular porcine corneal matrix. Trypan blue and alizarin red S co-staining showed that B4G12 cells were alive after two wk in organ culture and cell boundaries were clearly delineated. Proper localizations of ZO-1 and Na+/K+ ATPase were detected by immunofluorescence assay. Functional experiments were conducted to show that the Na+/K+ ATPase inhibitor ouabain could block the ionic-pumping function of this protein, leading to persistent swelling of 51.7 per cent as compared to the control. Interpretation & conclusions: Our findings showed that B4G12 cells served as a good model for native corneal endothelial cells in vivo. Corneal endothelium equivalents had properties similar to those of native corneal endothelium and could serve as a good model for in vitro study of human corneal endothelium.

Ceratoplastia endotelial com desnudamento da Descemet(DSEK) utilizando o dispositivo TAN EndoGlideTM: série de casos / Endothelial keratoplasty: Descemet stripping (DSEK) using TAN EndoGlideTM device: case series

OBJETIVO: Relatar os resultados da ceratoplastia endotelial com desnudamento da Descemet (DSEK) utilizando o dispositivo TAN EndoGlideTM para facilitar a introdução da membrana endotelial. MÉTODOS: Série de casos consecutivos, prospectiva. Foram incluídos 9 pacientes com edema corneano secundário à disfunção endotelial. Melhor acuidade visual corrigida, refração, astigmatismo ceratométrico, espessura corneana central, densidade das células endoteliais e complicações foram analisadas após seguimento de seis meses. RESULTADOS: Houve melhora do edema de córnea e da visão em 7 pacientes (77,78 por cento). A melhor acuidade visual corrigida ficou entre 20/40 e 20/200. A densidade endotelial média após 6 meses variou entre 1.305 céls/mm² e 2.346 céls/mm² com média de perda de 33,14 por cento. Desprendimento de parte do enxerto ocorreu em 1 olho (11,11 por cento), falência primária do transplante endotelial em 2 olhos (22,22 por cento). CONCLUSÃO: O dispositivo TAN EndoGlideTM facilita a introdução do enxerto na ceratoplastia endotelial com desnudamento da Descemet.

PURPOSE: To report the results of Descemet stripping endothelial keratoplasty (DSEK) using the TAN EndoGlideTM device to facilitate the insertion of the endothelial membrane. METHODS: Prospective clinical study that included nine patients presenting corneal edema secondary to endothelial dysfunction. Best corrected visual acuity, refraction, central corneal thickness, endothelial cell density and complications were analyzed after a six-month follow-up. RESULTS: There was a significant improvement in the corneal edema and visual acuity in 7 patients (77.78 percent). The best corrected visual acuity ranged between 20/40 and 20/200. The average density of endothelial cells in six months varied between 1,305 cells/mm² and 2,346 cells/mm² with an average loss of 33.14 percent cells. Detachment of part of the graft was observed in one eye (11.11 percent) and primary failure of the endothelial transplantation occurred in 2 eyes (22.22 percent). CONCLUSION: The device TAN EndoGlideTM facilitates the introduction of the graft in Descemet stripping endothelial keratoplasty.

Técnica de separação da membrana de Descemet para transplante de células endoteliais da córnea: estudo experimental em coelhos / Technique for separating Descemet membrane for corneal endothelial cells transplantation: experimental study in rabbits

OBJETIVO: Avaliar a porcentagem de dano endotelial induzido por uma técnica cirúrgica para a separação da membrana de Descemet contendo endotélio sadio, analisar a viabilidade e eficácia desta técnica, e avaliar a porcentagem de dano endotelial causado pela inversão da córnea em câmara anterior artificial. MÉTODOS: As córneas de três grupos de 12 coelhos da linhagem Nova Zelândia foram avaliadas. O grupo 1 foi usado como controle; portanto, as córneas foram analisadas após coletadas e trepanadas. O grupo 2 foi analisado após a inversão da córnea (endotélio para cima na posição convexa), montada em câmara anterior artificial, para o cálculo da porcentagem do dano endotelial induzido por esta inversão. O grupo 3 foi avaliado após a separação entre a membrana de Descemet e o estroma com o uso de substância viscoelástica em córneas invertidas e montadas em câmara anterior artificial. O dano endotelial foi avaliado por meio de fotografias digitais tiradas no microscópio após impregnar o endotélio com vermelho de alizarina. Amostras do grupo 3 foram processadas para avaliação histopatológica. RESULTADOS: O grupo 3 (separação viscoelástica) apresentou um índice de lesão celular endotelial de 10,06 por cento, o grupo 2 apresentou um índice de 3,58 por cento e o grupo controle um índice de 0,18 por cento de lesão celular endotelial (p<0,05). A avaliação histológica das córneas do grupo 3 revelou que aproximadamente 120 µm de espessura estromal manteve-se aderido à membrana de Descemet. CONCLUSÃO: Esta técnica deve ser melhor investigada, pois é uma alternativa viável e eficaz de separação da membrana de Descemet para transplante celular endotelial, já que o porcentual de dano celular induzido é de 10,06 por cento. A porcentagem de dano celular causado pela inversão da córnea em câmara anterior artificial foi de 3,58 por cento.

PURPOSE: To evaluate the percentage of endothelial cell damage induced during a surgical technique of Descemet's membrane separation containing healthy endothelium, analyze the viability and efficacy of this technique, and evaluate the percentage of endothelial cell damage caused by inversion of the cornea on an artificial anterior chamber. METHODS: The corneas from three groups of 12 New Zealand rabbits were evaluated. The Group one was used as the control, so the corneas were analyzed after collected and trephinated. The Group two was analyzed after inversion of the cornea (endothelial side up at a convex shape) mounted on an artificial anterior chamber to calculate the percentage of endothelial cell damage caused by this inversion. The Group three was evaluated after the separation between the Descemet's membrane and the stroma using viscoelastic substance in corneas inverted and mounted on an artificial anterior chamber. The endothelial cell damage was analyzed by digital photographs taken under a microscope after staining the endothelium with alizarin red. Group three samples were processed for histologic evaluation. RESULTS: The Group three (viscoelastic separation) showed an index of endothelial cell damage of 10.06 percent, the Group two showed an index of 3.58 percent and the control group an index of 0.18 percent of endothelial cell damage (p<0.05). Histological evaluation of the Group three corneas revealed that approximately a 120 µm thickness of stroma remained attached to the Descemet's membrane. CONCLUSION: This technique should be better investigated because it is a viable and efficient alternative of Descemet's membrane separation for endothelial cells transplantation, since the percentage of induced cell damage is 10.06 percent. The percentage of endothelial cell damage caused by inversion of the cornea on an artificial anterior chamber was 3.58 percent.

Femtosecond laser-assisted lamellar keratoplasty / Transplante lamelar auxiliado pelo laser de fentosegundo

Lamellar keratoplasty consists of transplanting partial-thickness donor cornea onto a complementary recipient bed. Manual lamellar dissection is technically very difficult, time-consuming, and imprecise. Also, the manually-dissected lamellar interface often has topographical irregularities that may optically degrade the best-corrected visual acuity. The femtosecond clinical laser (IntraLase FS LaserTM, Irvine, CA) is a recent innovation that can be programmed to produce bladeless, precise lamellar cuts at any depth with accompanying trephination cuts for both anterior and posterior lamellar transplantion. Posterior laser cuts may be used to assist in deep lamellar endothelial keratoplasty or Descemet's stripping automated endothelial keratoplasty.

A ceratoplastia lamelar consiste em transplante de espessura parcial da córnea doadora em um leito receptor complementar. A dissecção lamelar manual é técnica de difícil realização, imprecisa e que demanda tempo. Além disso, a interface lamelar freqüentemente apresenta irregularidade topográfica que pode comprometer a acuidade visual final. O laser clínico "femtosecond" (IntraLase FS LaserTM, Irvine, CA) é uma recente inovação que pode ser utilizado para produzir cortes lamelares precisos em qualquer profundidade da córnea, acompanhados de cortes verticais tanto para transplantes lamelares anteriores como posteriores sem a utilização de lâminas. Os cortes posteriores podem ser utilizados para a realização de ceratoplastia endotelial lamelar profunda ou ceratoplastia endotelial com remoção da membrana de Descemet.

Case Report: Femtosecond Laser-Assisted Small Incision Deep Lamellar Endothelial Keratoplasty

PURPOSE: To report two cases of femtosecond laser-assisted small incision deep lamellar endothelial keratoplasty (DLEK) for patients with corneal endothelial decompensation by Fuchs dystrophy and glaucoma METHODS: Femtosecond laser (IntraLase(R); IntraLase Corp., Irvine, CA) with 15 kHz of repetition rate, was used for a 9.5 mm diameter by 400 micrometer thickness donor corneal lamellar dissection. RESULTS: In Case 1, the graft was clear and compact without interface haze, Orbscan showed smooth and regular corneal surface, specular microscopy was unremarkable without sign of corneal endothelial damage, and Optical coherence tomography showed uniform graft well attached to recipient stroma with minimal interface reflection at 2 months postoperation. In Case 2, the graft was clear and compact with minimal interface haze at 1 month postoperation. Femtosecond laser-assisted small incision DLEK was safe and technically feasible in our cases; however, further evaluation is required to determine long-term effects.

Case Report: Femtosecond Laser-Assisted Small Incision Deep Lamellar Endothelial Keratoplasty

PURPOSE: To report two cases of femtosecond laser-assisted small incision deep lamellar endothelial keratoplasty (DLEK) for patients with corneal endothelial decompensation by Fuchs dystrophy and glaucoma METHODS: Femtosecond laser (IntraLase(R); IntraLase Corp., Irvine, CA) with 15 kHz of repetition rate, was used for a 9.5 mm diameter by 400 micrometer thickness donor corneal lamellar dissection. RESULTS: In Case 1, the graft was clear and compact without interface haze, Orbscan showed smooth and regular corneal surface, specular microscopy was unremarkable without sign of corneal endothelial damage, and Optical coherence tomography showed uniform graft well attached to recipient stroma with minimal interface reflection at 2 months postoperation. In Case 2, the graft was clear and compact with minimal interface haze at 1 month postoperation. Femtosecond laser-assisted small incision DLEK was safe and technically feasible in our cases; however, further evaluation is required to determine long-term effects.

MALKS®: especificações e desenvolvimento / MALKS®: specifications and development

OBJETIVO: Descrever as características de uma nova câmara anterior artificial e discutir suas vantagens (MALKS®, Loktal, São Paulo, Brasil). MÉTODOS: Análise e descrição das especificações técnicas utilizadas na câmara anterior artificial MALKS® (Micro automated lamellar keratoplasty system). RESULTADOS: O MALKS® é constituído de oito partes: a) câmara artificial; b) anel fixador da córnea; c) porca de travamento do anel fixador; d) trilho e ajustador do diâmetro do disco lamelar; e) aplanadores para aferição e definição do diâmetro do disco lamelar; f) sistema de infusão, que possibilita o controle digital objetivo peroperatório da pressão intracameral; g) microcerátomo automático; h) trépano marcador. CONCLUSÃO: O MALKS® utiliza o mesmo microcerátomo automático desenvolvido para LASIK, possibilita a obtenção de lamelas corneanas de espessura e diâmetro programados, assim como o controle objetivo peroperatório digital da pressão intracameral (PIC). Esta câmara anterior artificial pode ser ferramenta importante tanto para as cirurgias de transplante lamelar superficial quanto endotelial.